理論得到證明

路易斯對於自己否定自然發生論的思想始終確信不疑，為了獲得明確的證據，他繼續從事實驗。

他為了新的實驗，特地設計了一種玻璃燒瓶，那就是綽號“天鵝脖子”的曲頸瓶。這是一種玻璃圓球頂突出一個長管，管形如S字橫寫，管的先端有開口的燒瓶。

路易斯將易腐溶液倒入球形瓶中，將球形瓶頂端的瓶頸置於高熱火焰中，然後把燒灼得通紅的瓶頭拉長成橫寫的S形，這樣一來，短而略粗的瓶頸就變成細長彎曲的“天鵝脖子”了。接著他把曲頸瓶放在火上，煮沸其中的易腐溶液，這樣溶液中微生物就全部死亡了。

煮的時候，水蒸氣通過曲頸向外溢出。煮沸一段時間後，將曲頸瓶下的火移開，但不要移動曲頸瓶，讓它自然冷卻，不久，瓶外的空氣反向瓶內徐徐流入，因為空氣流動得很慢，所以當空氣流經曲頸向下低彎的部分時，空氣中的孢子和灰塵就沉降下來而附於管壁內。隨後，空氣繼續流入瓶內，而和液麵接觸。

通過上麵所說的這種程序處理過的任何易腐溶液，都決不腐敗。如果想讓它腐敗，可以搖**曲頸瓶，或將瓶頸傾斜，使液麵接觸到落有孢子和灰塵的曲頸低彎部分也可以。

這是很簡單卻非常巧妙的實驗。路易斯根據這個實驗發表了如下的結論：“生物自然發生的事情是絕不會有的。如果生物是自然發生的話，那麽不論在任何情況下，都該會發生。但是，容易腐敗的溶液如果不接觸到孢子，就不會腐敗。隻要是腐敗現象，都是因微生物的活動使東西分解而發生的。不接觸孢子就不腐敗的現象，顯示沒有孢子就不會產生微生物。這就是說，微生物是由空氣中的孢子生成的。任何生物，沒有親代就不能衍生。所以我可以斷言，生物的自然發生說，絕對是錯誤的。”

普歇仍舊不服，他反駁說：“煮沸曲頸瓶溶液後，靜止冷卻時，反流入瓶內的空氣中，你認為有孢子，而我認為空氣中本就沒有你所謂的孢子，你該怎麽證明這個問題？”

這個疑問是合理的，怎樣證明反流入瓶內的空氣中一定有孢子存在呢？經過反複深入的思考，路易斯想到一個問題：“可能由於場地的不同，空氣中所含的孢子或多、或少、或甚至沒有。”於是他又開始做新的實驗。

就像上一次的實驗一樣，他將酵母溶液倒入球形瓶中，再將頂端瓶頸置於高溫火焰內灼紅，然後往下拉成倒U字形，管口向下。接著把酵母溶液煮沸，當溶液仍在滾沸時，就用火熔封管口。路易斯像這樣做了很多燒瓶，以備實驗之用。

根據路易斯的理論，像這樣封閉的酵母液，不論放置多久，應該不腐敗的。事實證明，這些酵母液存放於阿爾布瓦他的家中，以後經數十年確實沒有腐敗。

如果將瓶頸銼開，由於瓶內幾無空氣（因煮沸之後，瓶內空氣外溢），所以含有塵埃（孢子）的外界空氣就急速流入瓶內。接著用高溫火焰再封閉瓶口，將它放入恒溫槽，保持在25℃～30℃之間，於是，進入瓶內的孢子發芽而使溶液腐敗了。

路易斯帶了備用的瓶子，到各種場地去實驗，結果發現瓶內酵母液，有的會腐敗，有的不會，確實是因地區而異。

他去往巴黎的天文台，選擇了兩個地方。一個地方是在貯放重要設備的地下室，打開了10瓶，隻有1瓶腐敗；一個地方是在庭院，打開11瓶，全都腐敗了。

學校放暑假時，路易斯帶了73瓶回故鄉阿爾布瓦，實驗了其中的20瓶，結果8瓶腐敗了。

路易斯再去往沙蘭，爬到海拔850米的山頂，打開了20瓶，腐敗的僅5瓶。他想：“腐敗的瓶數，此地比阿爾布瓦少了3瓶。可能是空氣較阿爾布瓦的新鮮清潔，而孢子數量較少的緣故，越高的地方，孢子可能就越少。”

為了證明這項推論，他去往阿爾卑斯山。路易斯找了一頭騾子背著裝了30瓶酵母液的箱子，路易斯跟在騾子的後麵，小心照顧著貴重的行李，往山上爬。到達阿爾卑斯山的大冰河後，路易斯花費了很多精力，小心處理了20瓶。結果，腐敗的隻有1瓶而已。

1860年11月，路易斯向科學院提出了如下報告：“我將迄今實驗所得結果加以比較對照，確信浸出液中生物發生的原因，是空氣中飄浮的灰塵。”

在路易斯旅行各地做實驗的同一時期，普歇也去往意大利的西西裏島，在山上或海上做了實驗。結果，普歇公布了如下結論：“含塵多的都市空氣也好，極為清淨的海上或山上的空氣也好，都發生了生物。任何地方的空氣，都同樣地使生物自然發生。”

關注這一爭論的人們，大多認為普歇的學說是正確的。例如，某報的科學欄寫了如下的評論：“巴斯德先生，想必你所做的實驗會反證你自己的學說。你所主張的事，想來是不可能有的。”

為了解決這一爭論，經過兩人的同意，法國科學院組成裁判委員會。1864年6月21日，兩人到科學院做公開辯論。路易斯在委員會中，除了口頭說明，並當場做實驗。普歇隻是在一邊觀察了路易斯的實驗，提出一些反駁詰問而已，並沒做實驗。

結果，該委員會一致認為路易斯的學說正確，並頒獎給他。科學院的一位元老是生理學家，他當場宣布：“巴斯德先生的實驗是決定性的，如果生物是自然發生的話，那麽獲得代生物的必要條件是什麽呢？是空氣和腐敗性溶液。巴斯德先生證明了必須使空氣和腐敗性溶液在一起才會發生生物。所以，生物不是自然發生的，沒有充分理解的人，才會繼續懷疑巴斯德先生的實驗。”

路易斯終於擊破生物自然發生說，揭曉了“生物來自親代的生物”的現象。

後來的科學家發現，普歇實驗時所用的枯草浸出液中所含的枯草菌，耐熱性很強，即使是用100℃高溫燒煮，也不容易殺死。所以，普歇實驗的結果，浸出液總是腐敗，導致他得出了錯誤的結論。

路易斯“生物來自生物”的結論是說，種瓜得瓜，種豆得豆。人是生物，猴子也是生物，但人不會生猴子，猴子也不會生人。

但是，路易斯卻沒有解決一個問題：“世界上的第一個生物是怎樣來的呢？”這也許就是路易斯的老師們不讚成他研究自然發生論的原因吧！